大鼠死后管家基因mRNA稳定性及其时序性降解与PMI相关性研究

目的 研究脑组织及骨骼肌内 β-actin、GAPDH、RPL32、PKG1、SDHA、RPL13、HPRT、TBP、YWHAZ死后稳定性及其相对表达量与死亡时间(PMI)的相关性.方法 取健康成年SD大鼠33只,依据据死亡时间不同随机分为11组(0h、1h、3h、6h、12h、24h、2d、4d、8d、16d、24d),分别在各时间点取大鼠胫骨前肌及脑组织约50mg,提取各组织总RNA,利用RT-qPCR技术检测9种管家基因的mRNA相对表达量.运用geNorm、NormFinder和BestKeeper软件对基因稳定性进行评价,利用spss软件对内参标准化的mRNA指标进行回归分析.结果 脑组织及骨骼肌中均为HPRT稳定性最高,适合用于本研究的内参基因.脑组织中SDHA、RPL32及TBP 3种指标的相对表达量变化与PMI有一定的线性关系.骨骼肌中mRNA指标相对表达量与PMI之间没有显著的相关性.结论 脑组织及骨骼肌是较适宜推断晚期死亡时间的检材.脑组织中SDHA、RPL32及TBP 3种mRNA的相对表达量变化与PMI有一定的线性关系,有望成为推断PMI的辅助指标.