自动化Chelex-100法在接触性检材DNA提取中的应用研究
Forensic Science and Technology（2017）
Abstract
目的使用Chelex-100方法在核酸载体分离板(96孔)上对接触性生物检材DNA进行载体分离和纯化,并将其与TECAN Freedom EVO150-8自动化工作站进行结合,建立起一种自动化、快速、灵敏、高效的DNA提取方法并探讨其在法医学中的应用价值.方法在核酸载体分离板(96孔)上使用Chelex-100液裂解DNA,通过高速离心实现批量生物检材载体与DNA分离;通过编写EVO150-8自动化工作站应用程序实现批量生物检材的快速提取、PCR构建一体化过程;采用Identifiler Plus试剂盒进行PCR扩增,扩增产物经3500 xL遗传分析仪电泳,GeneMapper ID-X软件分析检测结果.结果在994份生物检材中,成功获得456份检材STR分型,平均检验成功率在45.88％;对92份生物检材DNA提取及PCR构建,仅耗时60 min.结论本研究应用核酸载体分离板(96孔),建立的自动化Chelex-100法快速、高效、灵敏,适用于批量接触性检材的DNA检测.
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