水果中毒死蜱农药残留生物条形码免疫分析方法研究

为了更加灵敏地检测水果中毒死蜱农药残留,研究建立基于实时荧光定量PCR (qPCR)的高灵敏生物条形码免疫分析方法.研究将毒死蜱半抗原与鸡卵清白蛋白(OVA)结合,再将此偶联物连接到磁性纳米颗粒上,另将毒死蜱特异性抗体、生物条形码以及经巯基修饰的与生物条形码互补DNA链连接到胶体金纳米颗粒上,随后待检毒死蜱分子会与固定在磁性纳米颗粒上的半抗原竞争性结合胶体金纳米颗粒上的抗体,最后将生物条形码解离下来,通过qPCR检测,DNA相对量与待检农药的含量成负相关.研究结果表明,该方法的最低检测限是0.27 μg/L,IC50为19.3 μg/L,线性范围是1～1 000μg/L.在苹果和梨两种基质中平均添加回收率为79％～90％,相对标准偏差(RSD)为11％～16％.因此,该方法的建立对于实际样品的检测具有重要意义.