高速逆流色谱结合半制备型液相色谱分离茶树紫芽花色苷研究

花色苷是植物中一类具有重要生物活性的次生代谢产物,因其含量较低,使得分离制备花色苷高纯品难度较大.本研究以茶树紫芽为实验材料,以花色苷得率与纯度为考察指标,优化筛选了应用高速逆流色谱结合半制备型液相色谱分离纯化花色苷高纯度的方法.结果表明,茶样经提取、脱脂、阳离子交换树脂分离等前处理后,总花色苷得率28.18 mg/g,纯度为20.38％;以高速逆流色谱分离的最优溶剂体系乙酸乙酯:正丁醇:乙腈:0.1％ 三氟乙酸水溶液=8:35:13:60(v/v/v/v),除去部分杂质后,总花色苷得率达到160.59 mg/g,纯度为43.64％,再结合半制备型液相色谱分离出5种花色苷组分,纯度最高达90.61％,其优化色谱条件为C18制备柱、波长280 nm、柱温30℃、流动相1％醋酸水溶液(A)-乙腈(B)、流速5 mL/min、进样量1 mL、梯度洗脱(0～55 min,10％～40％B).研究表明高速逆流色谱结合半制备型液相色谱可有效地分离纯化茶树紫芽花色苷及其组分.