超声微泡破裂法促进骨形态发生蛋白-2在大鼠骨髓间充质干细胞表达的研究

目的：探讨超声微泡破裂法对基因重组人骨形态发生蛋白-2（rhBMP-2）质粒GV 147-rhBMP 2-GFP在大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）的转染、表达的促进作用。方法选取8周龄Sprague-Dawley雄性大鼠分离培养BMSCs，传至第3代时胞悬液分为3组：A组（单纯细胞组），B组（质粒组，仅加质粒GV 147-rhBMP 2-GFP）及C组（超声+微泡+质粒组）；转染后48 h用倒置荧光显微镜观察质粒转染情况及细胞生长状况，RT-PCR检测细胞转染后的目的基因表达。对数据进行分析。结果48 h后可在倒置荧光显微镜下，观察到质粒组及超声+微泡+质粒组部分细胞胞浆内发出绿色荧光，其中单纯细胞组未见绿色荧光，超声+微泡+质粒组的绿色荧光表达量高于B组；RT-PCR检测显示C组BMP-2基因mRNA相对表达量较B组高。结论超声微泡破裂法能增加外源性rhBMP-2基因在大鼠骨髓间充质干细胞转染率和表达水平，有望为骨折的基因治疗提供一种新型方法。