山区型和田羊毛囊KAP1.1基因表达载体构建及生物信息学分析

为了分析山区型和田羊毛囊角蛋白关联蛋白(Keratin associated protein,KAP1.1)基因对绵羊羊毛产量与品质的影响.以山区型和田羊皮肤毛囊为试验材料,提取总RNA,反转录获得cDNA,PCR扩增毛囊KAP1.1基因,插入pMD18-T载体,构建pMD18-T-KAP1.1克隆质粒,双酶切鉴定后构建pEGFP-N l-KAP1.1真核表达重组质粒,做PCR、双酶切鉴定后送公司测序,并进行生物信息学分析.结果表明:成功构建了pEGFP-N l-KAP1.1真核表达重组质粒,获得了山区型和田羊毛囊KAP1.1基因编码序列,片段全长为519 bp,编码172个氨基酸.与GenBank中美利奴绵羊序列比对,碱基序列同源性达98.85％,氨基酸序列同源性达97.09％.说明试验成功构建了毛囊KAP1.1真核表达载体,并获知了山区型和田羊KAP1.1基因与蛋白序列.