聚乙二醇修饰重组人粒细胞集落刺激因子的生物学活性验证

通过细胞集落实验和体外活性实验,对聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子(PEG-rhG-CSF)和重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)的体外生物学活性进行对照验证,为临床应用提供理论依据.通过小鼠骨髓瘤细胞集落实验研究PEG修饰前后rhG-CSF因子对细胞集落形成的影响;按照药典(2015版)标准,采用新型染剂CCK-8、MTS和原染剂MTT,对PEG-rhG-CSF和rhG-CSF进行体外生物学活性的测定.结果显示,PEG-rhG-CSF对小鼠骨髓瘤细胞集落形成的作用明显强于rhG-CSF (P＜0.05),集落数目多(38.5±4.2个),集落大且密集;新型染剂CCK-8在体外生物学活性的测定效果最好,R2超过0.995,曲线拟合更好,在最适体外生物活性范围内(0.1～400 IU·mE-1),PEG-rhG-CSF吸光度值(0.75±0.027)明显高于rhG-CSF(0.36±0.036).聚乙二醇修饰在体外药效方面显示了更强的长效特征,对体外生物学活性有增强效应,重复性良好,回收率较高.