水稻 OsAAA1蛋白的原核表达载体构建及其可溶性表达研究

为使用外源表达载体表达并纯化有活性的水稻ATP酶蛋白OsAAA1，构建了pET-32a-OsAAA1原核表达载体并进行体外IPTG诱导表达和Ni＋柱亲和层析纯化。利用SDS-PAGE和Western Blot检测了目的蛋白。结果表明：将成功构建的pET-32a-OsAAA1原核表达载体，转化到大肠杆菌Origami菌株后，在70～100 KD之间检测到可溶性目的蛋白带，并优化了诱导表达的较适温度、IPTG诱导浓度和诱导表达时间。故成功构建了pET-32a-OsAAA1原核表达载体并获得了可溶性OsAAA1目的蛋白，为其后续研究奠定了基础。