耐辐射菌Micrococcus luteus SC12O4总蛋白双向电泳体系的建立

以耐辐射藤黄微球菌Micrococcus luteus SC1204为研究对象,建立总蛋白双向电泳体系.结果表明,采用液氮研磨-酚/超高速离心法提取总蛋白,裂解液Ⅱ(8 mol/L尿素、2 mol/L硫脲、60 mmol/L DTT、4％ CHAPS、40 mmol/L Tris、1％ pH 3～10 NL IPG buffer、0.002％BPB)溶解蛋白,使用24 cm、pH 4～7的IPG胶条,上样量250 μg及等电聚焦7h(56000Vh),可获得满意分辨率的双向电泳图谱,适用于后续的质谱及差异蛋白质组分析.