人神经营养素-4基因的原核表达与纯化

JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE EDITION)(2005)

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摘要
以人外周血淋巴细胞基因组DNA为模板,用PCR方法扩增出神经营养素-4基因(NT-4)成熟蛋白的DNA序列,并将其克隆到表达载体pET32a中,在大肠杆菌BL21(DE3)中经异丙基-β-D-半乳糖苷(Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导后高效特异表达了分子量约为35kD的蛋白,诱导表达的蛋白主要存在于包涵体中,经Ni2+ -NTA树脂亲和层析纯化,得到了纯度达94%的NT-4成熟蛋白的融合蛋白.为进一步研究NT-4的生物学活性及在临床治疗中的作用打下了基础.
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