高拷贝pPIC6HK-α-hEGF表达载体构建及其在毕赤酵母中的表达与鉴定

Journal of Anhui Science and Technology University（2020）

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摘要

目的:为提高毕赤酵母对hEGF外源表达量,旨在为hEGF规模化生产及临床应用打下良好基础.方法:以构建载体pPIC6HK为基础,插入多份α-hEGF基因拷贝表达框,构建pPIC6HK-α-hEGF表达质粒,并电转入毕赤酵母后筛选高转化子,经发酵获得分泌表达目的蛋白,通过ELISA进行定量检测.结果:筛选到高拷贝转化子阳性菌株表达α-hEGF蛋白含量分别为133.61μg/mL和174.88μg/mL.结论:成功构建了高拷贝表达载体,α-hEGF在毕赤酵母GS115细胞中高效表达.

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