牛病毒性腹泻病毒(BVDV)E0蛋白原核表达及间接ELISA方法的建立
Journal of Shihezi University(Natural Science)（2018）
Abstract
牛病毒性腹泻病毒(BVDV)能够引起牛羊的持续感染,临床上很难对其根除,建立该病有效检测方法对净化畜群具有重要意义.本研究构建BVDV E0蛋白基因重组表达载体在大肠杆菌中诱导表达,用重组的E0蛋白为包被抗原,确定抗原最佳包被浓度为5 μg/mL,最佳血清稀释比为1∶10,最佳封闭液为5％脱脂奶粉,最佳封闭条件为37℃封闭2h,酶标二抗稀释度为1∶5000,作用时间为30 min,样品临界值X+2S为0.278.该方法与IDEXX的BVDV间接EHSA试剂盒比较总符合率为86％,与口蹄疫病毒、牛支原体、牛传染性鼻气管炎病毒、牛副结核、牛布鲁氏菌病阳性血清无交叉反应.该检测方法能够用于BVDV抗体水平的临床检测,可为感染病畜的合理淘汰提供实验依据.
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