TALENs和CRISPR/Cas9诱导绵羊成纤维细胞基因组定点双链断裂提高Rad51基因表达量

Jiao YANG,Wenhui PI,Ping ZHOU,Weijie LI,Gaoming HE

Journal of Shihezi University(Natural Science)（2015）

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摘要

为检测不同限制性人工核酸内切酶对绵羊成纤维细胞Rad51基因mRNA转录和蛋白表达的影响,本实验将有效切割MSTN(myostatin)基因位点的TALENs和CRISPR/Cas9人工核酸酶电转染到体外培养的绵羊成纤维细胞中诱导产生DNA双链定点断裂,与正常和电转染pMax绿色荧光蛋白报告基因质粒的绵羊成纤维细胞进行对照,采用实时荧光定量PCR和Western Blot方法对不同处理的绵羊成纤维细胞Rad51基因mRNA转录和蛋白质的表达情况进行研究.结果表明:TALENs和CRISPA/Cas9人工核酸酶诱导产生的MSTN基因组DNA双链定点断裂能提高绵羊成纤维细胞Rad51基因表达量.

关键词

homologous recombination,TALENs,CRISPR/Cas9,protein Rad51

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