杜洛克与梅山猪大卵泡消减文库的构建

为了鉴定杜洛克猪相对于梅山猪在大卵泡中高表达的基因,本研究应用抑制性消减杂交技术成功构建了以梅山大卵泡cDNA为driver,杜洛克大卵泡cDNA为tester的消减cDNA文库.结果显示:以G3PDH和β-actin为指标检测文库的消减效率为25,从该文库中获取了350个有效的阳性克隆,PCR检测插入片段主要分布在150-750 bp.克隆测序得到74个有效的EST序列,GO分析表明主要与细胞信号、细胞结构、代谢、细胞分化、基因/蛋白质合成、细胞组织防护等功能相关.利用qPCR技术验证了ELTD1、Grbl4、SNRPE、CSDE1、ALDH 18A1、eIF4E、BMPR-IB等基因在梅山和杜洛克大卵泡中的表达模式.结果发现在两猪种的大卵泡间存在显著性差异.本研究有助于揭示影响猪卵泡发育和生殖数量控制的分子基础.