猪瘟 E2基因多克隆抗体的制备及其特性分析

以CSFV FJ‐1株为模板对猪瘟E2基因的主要抗原表位进行PCR扩增，得到大小为370bp的目的片段，将其连接到pET‐32a表达载体，转化BL21后利用IPTG诱导其表达， SDS‐PAGE 和Western blot分析表明，目的蛋白成功获得表达，大小约33?.5ku融合蛋白。利用Ni‐NTA agarose纯化蛋白、重组蛋白与弗氏完全佐剂充分乳化后免疫新西兰兔，多克隆抗体效价经间接ELISA检测可高达1∶6400。Western blo t结果表明该重组蛋白具有良好的反应原性，试验结果表明已成功获得猪瘟E2基因的多克隆抗体且能识别CSFV FJ‐1毒株。