抗Y-box结合蛋白冷休克域单克隆抗体的制备及其初步应用

固相法合成Y-box结合蛋白冷休克域部分片段"14肽"(H2N-NGYGFINRNDTKED-COOH, 简称ND),用不同载体蛋白经戊二醛一步法偶联得到免疫抗原(BSA-ND)和检测抗原(OVA-ND)..用免疫抗原免疫BLAB/c小鼠,经间接法ELISA检测,得到对ND有足够免疫应答的小鼠.采用常规单克隆抗体制备的方法,得到3株能稳定产生和分泌抗ND单抗的克隆细胞株,单抗的亚型均为IgM.Western Blotting结果显示:该单抗能识别中华大蟾蜍(Bufo bufo gargarizans)Ⅰ、Ⅱ期卵母细胞中的热稳定Y-box结合蛋白p54,并能识别中华大蟾蜍高、低温卵中一种分子量约为80kD的蛋白(简称p80).由于p80在低温卵中含量高于高温卵中,推测可能是高温卵和低温卵中差异表达的Y-box结合蛋白之一.