产褐藻胶裂解酶菌株的筛选及发酵条件优化
Journal of Qingdao University(Natural Science Edition)(2019)
摘要
为进一步探索高产褐藻胶裂解酶菌株,促进其工业化应用,以褐藻酸钠为唯一碳源筛选培养基,从鲍鱼内脏中筛选出一株高产褐藻胶裂解酶菌株B4,通过形态学观察和系统发育分析,鉴定为弧菌属细菌Vibrio sp.B4.通过单因素实验对B4菌株的发酵条件和发酵培养基进行优化,获得发酵培养基的最适碳源为褐藻酸钠10g/L,最适氮源为(NH4)2SO410g/L,最适发酵条件为温度30℃,接种量1%,培养基初始pH 6.0.在单因素实验的基础上,通过Plackett-Burman (PB)筛选出3个影响产酶活力的显著因素:(NH4)2SO4浓度、pH、接种量.通过响应面进一步分析优化,得到最佳的发酵培养基为褐藻酸钠10g/L,(NH4)2SO4 10.91g/L,NaCl10g/L,KH2PO41g/L,MgSO4·7H2O 0.5g/L,CaCl2 0.2g/L,FeSO4·7H2O 0.02g/L,最佳发酵条件为温度30℃,接种量1.1%,起始pH 6.07.在最佳培养条件下,褐藻胶裂解酶活力可达19.09U/mL,比基础培养条件下提高了3.67倍.该菌经过产酶发酵条件的优化,酶活力得到较大幅度的提高,且其发酵产酶时间短,可为褐藻胶裂解酶的进一步研究应用提供参考.
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