超声辅助纤维素酶解提取大叶驼蹄瓣总黄酮工艺优化及其抑制α-葡萄糖苷酶活性研究

目的:筛选大叶驼蹄瓣(Zygophyllum macropodum,简写为Z.m)抑制α-葡萄糖苷酶(α-GE)作用强的部位,并以正交设计法优化其提取条件.方法:1)用索氏提取器加石油醚对Z.m进行脱脂;2)用70％乙醇提取,旋转蒸发至无醇后,依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取,旋转蒸发得不同极性部位;3)用酶标仪-96微孔板筛选对α-GE抑制作用最强的部位;4)用超声辅助纤维素酶解提取,以芦丁为标准品,用酶标仪-96微孔板法测定不同提取液中总黄酮含量,通过正交设计优化提取工艺.结果:乙酸乙酯萃取物对α-GE的抑制作用呈剂量依赖性增加,与同浓度的阿卡波糖相比,在浓度为10～20 mg/mL时显著性增强(P＜0.05);显色反应表明该萃取物主要成分为黄酮类;超声辅助纤维素酶解提取总黄酮最佳工艺为:在pH为5.0,温度为50℃时,乙醇浓度为60％、料液比为1∶25、加酶量7％和超声时间为60 min;3.0 g脱脂叶在最优水平条件下,提取2次,总黄酮提取率为(31.85士2.37)mg/g.