高效液相色谱/蒸发光散射法测定多黏菌素类原料药中主成分含量

建立了高效液相色谱/蒸发光散射法测定多黏菌素B和多黏菌素E原料药中主成分含量的分析方法.采用Phenomenex Kinetex Biphenyl色谱柱(50 mm ×4.6 mm i.d.,5μm)分离,甲醇和20 mmol/L乙酸铵水溶液(含0.6％甲酸)为流动相,梯度洗脱,流速为0.5 mL/min;蒸发光散射检测器参数为:漂移管温度55℃,气体压力20 psi,增益250.结果 表明,多黏菌素B和多黏菌素E在10～200 μg/mL质量浓度范围内线性良好,检出限分别为0.8μg/mL和1.2 μg/mL,定量下限分别为2.6μg/mL和4.0μg/mL.批内回收率分别为100％～104％和101％～103％,批内相对标准偏差(RSD)分别为0.90％～2.4％和0.90％～2.6％,批间回收率分别为101％～103％和101％～102％,批间RSD分别为1.1％～1.9％和1.3％～1.7％.与微生物检定法相比,该方法简便,能够更准确地反映原料药中目标分析物含量,精密度更高,可用于多黏菌素B和多黏菌素E两种原料药的质量控制.