响应面法优化重组大肠杆菌生物合成别藻蓝蛋白(holo-apcA)的发酵条件

采用响应面法对重组大肠杆菌生物合成别藻蓝蛋白(holo-apcA) 的发酵条件进行优化, 提高了蛋白的表达量.以对重组别藻蓝蛋白α亚基在大肠杆菌中表达量影响较大的几种因素用于中心组合设计; 中心组合设计试验结果表明诱导温度、培养基初始 pH 和诱导时机对诱导结果影响显著; 经 Design Expert 8.0软件优化后的最佳诱导条件为:诱导温度28℃ ,培养基初始pH 8.5, IPTG终浓度0.1 mmol/L,以及诱导时机3 h.最后验证试验得到的蛋白表达量在已有文献报道结果的基础上提高了70%~580%.中心组合设计-响应面法能够在有限的实验次数下, 对影响生物过程的因子进行优化及对其交互作用进行评价, 蛋白表达量达20.4 mg/L; IPTG用量由原来的1 mmol/L减少至现在的0.1 mmol/L,降低了发酵成本.