潘那利番茄SpCPK8基因的克隆、原核表达及亚细胞定位分析
Plant Physiology Communications(2020)
Abstract
钙依赖蛋白激酶在植物生长发育及生物和非生物胁迫响应过程中发挥重要作用.本文从野生番茄潘那利中获得了一个钙依赖蛋白激酶基因SpCPK8,对其进行了理化性质、蛋白结构、进化树、原核表达和亚细胞定位分析.结果 显示,该基因包含一个1 674 bp的完整开放读框,编码557个氨基酸,主要定位于细胞膜上;SDS-PAGE电泳及Western blot结果显示,SpCPK8重组蛋白的分子量约为62.22 kDa;进化树分析发现,其编码的氨基酸与马铃薯StCDPK4亲缘关系最近.RT-qPCR分析发现,SpCPK8在叶片中的表达量最高,且在干旱胁迫下表达量显著上调,能够积极响应干旱胁迫.本实验结果表明野生番茄SpCPK8是积极响应干旱胁迫的调节因子,为进一步研究植物CDPK的功能提供理论基础.
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