重组痘苗狂犬病毒糖蛋白的构建、表达及其遗传稳定性研究

狂犬病毒糖蛋白基因的痘苗病毒表达质粒pWS-4在鸡胚细胞内与野生型痘苗病毒天坛株(痘苗病毒)同源重组,经蚀斑纯化,获得表达狂犬病毒糖蛋白基因的重组痘苗病毒(重组病毒).该重组病毒DNA dot blot显示强阳性信号,间接免疫荧光试验胞膜及胞浆均见到强阳性荧光反应,Western blot分析仅在 64 ku处呈现一条狂犬病毒非融合性糖蛋白带.免疫小鼠和狗,第 28 d抗狂犬病毒中和抗体滴度分别达 2 430 和＞696.初免后14 d用 50～100 LD50狂犬病毒CVS株对小鼠脑内攻击,保护率达 80 %以上.致病性明显减弱.从第 11 代起连续传至 30 代,病毒纯度、病毒滴度、血凝滴度、蛋白的表达、抗原活性和保护性均无差异,说明该重组病毒有良好的遗传稳定性.