不同食物中诺如病毒检测方法的优化与评估

近年来,由病毒引起的食源性疾病越来越多,其中诺如病毒(Noroviruses,NoVs)是全球急性胃肠炎暴发的主要致病原.污染的食品是NoVs主要的传播途径之一.本文对不同食品中NoVs检测方法进行优化和评估,为我国NoVs引起的食源性病毒病的应对提供实验室检测技术支撑.以鼠诺如病毒(Murine norovirus-1,MNV-1)为模式病毒和过程对照病毒,优化和评估洗脱-浓缩法和直接RNA提取法,考察Trallk洗液、NaPP洗液、TGBE洗液和TPB洗液对新鲜果蔬食品(包括草莓、葡萄、洋葱和生菜)中MNV-1的洗脱效果,以及不同浓缩方法(PEG沉淀法和超滤法)对病毒洗脱液中MNV-1的浓缩效果;比较洗脱-浓缩法和直接RNA提取法对蛋白、脂肪类食品(蛋糕和午餐肉)中MNV-1的检测效果;评估优化后的方法对新鲜果蔬食品和蛋白、脂肪类食品中NoVs GⅡ的检测效果.结果 表明草莓、葡萄、生菜、洋葱中MNV-1的最优洗脱-浓缩方法分别是TGBE洗液-PEG沉淀组合、TGBE洗液-超滤组合、Trallk洗液-PEG沉淀组合和Trallk洗液-超滤组合.草莓和生菜中NoVs GⅡ的检测限可达103基因拷贝数/10g,而葡萄和洋葱中NoVs GⅡ的检测限为104基因拷贝数/10g.洗脱-浓缩法和直接RNA提取法回收蛋糕和午餐肉中MNV-1后的效果显示,前者没有回收到MNV-1,后者却成功回收到MNV-1,但是NoVs GⅡ的检测限高于其他种类食品,分别为106基因拷贝数/2g和104基因拷贝数/2g.本研究建立了新鲜果蔬食品和蛋白脂肪类食品中NoVsGⅡ的检测方法,从而优化和完善了我国食品中NoVs检测体系.