马铃薯天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因转化烟草研究
HEREDITAS(BEIJING)（2000）
Abstract
将马铃薯天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因由重组质粒pAPI189中亚克隆到双元表达载体pGA643的XbaI和KpnI位点之间,构建成高效表达重组质粒pGAPI3.三亲融合法将其转移至农杆菌LB4404.通过叶盘法利用此融合后的含有目的基因的农杆菌转化烟草叶圆片,在含有Km的培养基上筛选抗性芽.将抗性芽接种到生根培养基至长成完整植株后再移栽到土质中以获得转基因植株.通过目的基因的特异引物进行PCR检测以及目的基因的片段为探针进行Southern杂交检测,证实已获得马铃薯天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因的转基因烟草植株.
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