犬种布鲁氏菌的遗传多样性分析

[背景]犬种布鲁氏菌是犬种布病的病原菌,主要导致犬流产和繁殖障碍.虽然犬种布鲁氏菌感染人群的病例极为少凡,但是犬种布鲁氏菌对人的安全风险仍存在争议.目前,我国犬种布病的流行病学特征及犬种布鲁氏菌的遗传多样性的研究相对缺乏.开展犬种布病的流行特征及遗传多样性调查对加强犬种布病的监测防控具有重要意义.[目的]对犬种布病的流行病学特征和犬种布鲁氏菌的遗传多态性进行调查,为犬种布病的防拉提供参考.[方法]采用常规鉴定方法和 BCSS-PCR对 63株试验菌株进行鉴定.采用 HGDI(Hunter and Gaston diversity index)多态性指数调查犬种布鲁氏菌的遗传多态性,用 MLVA方法基于 BioNumerics 5.0软件对菌株进行聚类分析,揭示犬种布病的流行病学特点.此外,基于 MLVA-11 采用 goeBURST 软件构建犬种布鲁氏菌的最小生成树(Minimum spanning tree,MST),阐述我国犬种布鲁氏菌的地理起源特征.[结果]常规鉴定方法和BCSS-PCR扩增结果显示 63林试验菌株全部为犬种布鲁氏菌.BCSS-PCR与常规鉴定方法的符合率为 100％,BCSS-PCR的分析敏感性为 10-3(即 50 pg/μL犬种布鲁氏菌 DNA).我国犬种布鲁氏菌具有较高的遗传多样性,基于 HGDI分析表明 Panel 2B的 5个位点具有较高的变异度,等位基因型由高到底依次为 bruce09(11)＞ bruce07(8)＞bruce 16(7)＞bruce04(6)＞bruce30(5).MLVA聚类分析表明北京地区出现了 3次较小规模的犬种布病暴发流行,其余地区均为零星散发.我国犬种布鲁氏菌可分为5个地理集群,以 MLVA-11基因 26型克隆群为主导种群,该种群与来自美国、希腊、加拿大、法国、罗马尼亚和韩国等国家的菌林具有共同的地理起源,其余 4个种群为中国特有.[结论]我国犬种布鲁氏菌主现高度的遗传多样性并有广泛的地理来源,表现为输入性和中国特有血统共存的起源进化特征.