地衣芽孢杆菌TG116胞外蛋白酶产酶条件与酶学性质

[背景]从独角莲中分离得到的地衣芽孢杆菌TG116是一株对植物病原菌具有广谱抗性作用的生防菌株.[目的]优化TG116的产酶条件并探索其酶学性质,进一步了解其抗菌机制.[方法]采用Folin-Phenol显色法与响应曲面法,优化菌株TG116的产酶条件并研究其蛋白酶的酶学性质.[结果]菌株TG116产酶最适条件为:温度40.83℃,pH 8.01,发酵时间53.74 h,增加通气量可以显著提高酶活力.按照优化后的条件培养48 h后,上清液蛋白酶活力从57.46 U/mL达到了254.07 U/mL.酶学性质研究表明:该酶为碱性蛋白酶,最适反应pH为8.5,最适反应温度为50℃,具有良好的温度和pH稳定性,EDTA对酶活具有强烈的抑制作用,金属离子Mg2+、Ca2+、Na+、Co2+、K+等对酶活也具有一定的抑制作用.[结论]菌株TG116具有良好的pH与温度稳定性,在实际应用中蛋白酶不易失活,可以分解真菌的细胞壁蛋白成分,破坏细胞壁结构,从而抑制甚至杀死病原菌,达到抗菌作用.