仔猪副伤寒活疫苗中耐热保护剂应用相关参数的研究

[目的]研究并确定耐热保护剂在仔猪副伤寒活疫苗中应用的各参数,为制备细菌耐热保护剂活疫苗提供参考.[方法]将耐热保护剂与制苗菌液等体积混合,分别采用3种常用冻干曲线(1、2、3)进行冻干,抽样检测确定耐热保护剂配套冻干曲线.在确定合适冻干曲线的基础上,进一步研究耐热保护剂与不同菌龄菌液(发酵培养12、15、18和21 h)、不同浓度菌液(菌液终浓度分别为3×1010、5×1010和7× 10 10 CFU/mL)、不同感作时间(分别作用0、24和48 h)、耐热保护剂的不同保存时间(2-8℃分别保存0、10、20、30和40 d),以及不同分装量(2、3和4mL)等多种不同参数对疫苗质量的影响.[结果]配套冻干曲线研究表明,曲线2冻干的产品性状、活菌存活率与耐老化指标效果最好;菌龄研究表明,37℃发酵培养18h(位于对数生长末期或稳定前期),其冻干菌存活率达78％-81％,优于其它时间;配苗试验表明,菌液适宜终浓度为3× 1010-5× 1010 CFU/mL;最适感作时间为2-8℃感作24 h,冻干菌存活率可达85.3％-90.5％;耐热保护剂保存期试验表明,2-8℃保存40 d与0d(配制当日)的保护剂冻干效果基本一致;配苗分装量试验表明,7mL西林瓶中分装3mL或4mL,其冻干菌存活率与2mL基本一致,但耐老化试验中活菌存活率比2mL略高.[结论]收获发酵培养18h的菌液、配苗终浓度采用3×101o-5× 1010 CFU/mL,使用2-8℃保存40 d内的耐热保护剂,让保护剂与制苗用菌液2-8℃感作24 h,采用3-4 mL进行定量分装,按曲线2冻干为制备仔猪副伤寒耐热保护剂活疫苗的适合参数.