耻垢分枝杆菌MSMEG_6281过表达对菌株生长和形态的影响

[目的]耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis mC2155,mc2155) MSMEG_6281为结核分枝杆菌自溶素Rv3717的同源蛋白,通过建立过表达MSMEG_6281的耻垢分枝杆菌菌株,推测该蛋白对耻垢分枝杆菌肽聚糖代谢的影响.[方法]利用RT-PCR方法检测乙胺丁醇(Ethambutol,EMB)作用后MSMEG 6281基因的表达变化;以耻垢分枝杆菌基因组DNA为模板,采用PCR技术克隆MSMEG_6281基因,构建分枝杆菌表达质粒pVV16-MSMEG_6281,进一步建立MSMEG_6281过表达的耻垢分枝杆菌菌株;利用生长曲线检测MSMEG 6281过表达对耻垢分枝杆菌生长的影响;利用扫描电子显微镜分析MSMEG_6281过表达引起的耻垢分枝杆菌形态变化.[结果]EMB处理引起MSMEG.6281基因表达上调;构建了过表达MSMGE_6281的耻垢分枝杆菌菌株(mc2155/pW16-MSMEG_6281);过表达MSMGE_6281的耻垢分枝杆菌生长缓慢,菌体形态由短杆状转变为长杆状.[结论]MSMGE_6281的过表达可改变耻垢分枝杆菌形态.MSMGE_ 6281的功能与细胞壁肽聚糖水解相关,在mc2155细胞壁形态维持方面发挥重要作用.