高致病性2型猪链球菌plcR基因敲除株的构建及其相关生物学特性的研究

[目的]构建高致病性2型猪链球菌05ZYH33菌株plcR基因敲除株,通过比较突变株与野生株生物学特性的差异,研究plcR基因在2型猪链球菌致病过程中的作用.[方法]利用同源重组技术敲除plcR基因,多重交叉PCR及RT-PCR鉴定并测序验证.比较野生株与突变株基本生物学特性的差异,小鼠攻毒实验分析plcR基因缺失对细菌毒力的影响.[结果]经RT-PCR证实05SSU0241与05SSU0242共转录,通过多重交叉PCR及RT-PCR证实成功构建plcR基因缺失突变株,基本生物学特性显示突变株的生长速率、菌落形态、溶血活性均无显著改变,小鼠致病性试验结果显示,野生株攻毒的小鼠死亡率为70％,突变株攻毒的小鼠死亡率为40％,毒力较野生株显著降低.[结论]plcR基因作为2型猪链球菌有毒株基因组中特有的外源基因,在细菌致病过程中具有重要作用.