中华鳖转铁蛋白基因序列特征及表达研究

转铁蛋白是呼吸链的关键因子, 参与体液和免疫系统的调节, 具有抗菌抗病毒等功能.研究从嗜水气单胞菌诱导的中华鳖肝脏SMART cDNA文库中,分离克隆了中华鳖转铁蛋白基因cDNA和gDNA全序列,对其序列特征、组织表达及原核表达进行了分析研究.结果显示, 中华鳖转铁蛋白对应全长cDNA的基因组DNA全长为19100 bp,由17个外显子和16个内含子组成; cDNA全长为2359 bp,开放阅读框为 2094 bp,编码697个氨基酸;转铁蛋白的分子量为76.6 kD,包含2个糖基化位点,存在4个二硫键形成区域的缺失,两个同源结构域的相似性为 37%, 信号肽位于第 1—19 位点.荧光定量 PCR 结果显示, 正常组中华鳖转铁蛋白基因在肝脏中的表达量最大; 以嗜水气单胞菌刺激后, 其在心、肝、脾和肾脏组织中的表达, 均有一个上调后减少的趋势.此外,实验还进行了重组转铁蛋白原核表达和Western blot检测鉴定,为深入研究中华鳖转铁蛋白功能的提供了基础数据.