藻红蓝蛋白裂合异构酶E基因突变体的构建、表达与酶活性检测

通过诱变分别得到PecE的N端,C端和中间位置缺失突变的一系列突变基因的编码产物,测定了这5种缺失蛋白质的酶活性的大小.实验结果显示:来自层理鞭枝藻(M.laminosus,UTEX 1931)的PecE[简称 PecE(UTEX 1931)]与来自层理鞭枝藻(M. laminosus,.PCC 7603)的PecE[简称 PecE(PCC 7603)]有81%的同源性.PecE(UTEX 1931)/PecF(PCC 7603)的酶催化活性与PecE(PCC 7603)/PecF(PCC 7603)的酶催化活性相当.PecE(UTEX 1931)的N端缺失22个氨基酸的蛋白质显示出了约20%的催化活性;而N端缺失36个氨基酸、56个氨基酸的蛋白质,C端缺失23个氨基酸的蛋白质和PecE(PCC 7603)中间缺失27个氨基酸的蛋白质均丧失活性,结果对酶的结构以及对酶活性的影响提供了重要信息.