青海野生黑果枸杞再生体系的建立及遗传稳定性分析

以野生黑果枸杞(L ycium ruthenicum Murr.)的无菌苗叶片作为外植体,建立了两条再生体系:一条是经愈伤组织再分化的间接再生体系,一条是不经愈伤组织再分化的直接再生体系.并采用流式细胞术(FCM)及ISSR分子标记技术对两种途径再生苗进行了遗传稳定性分析.结果 表明:(1)最佳愈伤组织诱导培养基为MS+ 1.5 mg·L-12,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D),诱导率达100％;最佳分化培养基为MS+I.5mg·L-16-苄氨基腺嘌呤(6-BA)+0.1 mg· L-1吲哚-3-丁酸(IBA),1g愈伤组织上的平均不定芽数为39.4个.(2)叶片直接诱导不定芽的最佳培养基为MS+0.5 mg·L-1 6-BA+0.3 mg·L-1a-萘乙酸(NAA),不定芽诱导率为92.9 ％,每个外植体上平均不定芽数为18.1个.(3)两条途径再生的不定芽在不含植物生长调节剂的MS培养基上,2周内均可正常生根.(4)FCM结果显示亲本苗及2种再生苗均为二倍体.(5)ISSR分析表明,间接再生苗的平均遗传相似性系数为0.84,直接再生苗的平均遗传相似性系数为0.91,直接再生体系是一种更加快速高效的繁殖方法.