铁皮石斛同源四倍体工厂化快繁工艺研究

以实验室前期诱导的铁皮石斛四倍体为研究材料,利用气孔、叶绿体、染色体计数及流式细胞仪等方法,对铁皮石斛同源四倍体株系的纯合性进行鉴定,在此基础上利用茎段扩繁和原球茎诱导、增殖、分化两种方案比较增殖效率,并对原球茎的倍性稳定性进行再鉴定.结果表明:(1)实验室的‘花自-2'株系为纯合同源四倍体.(2)茎段扩繁最佳增殖培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+15％香蕉汁,茎段诱导原球茎最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.2 mg/L KT,诱导率达到76.66％;原球茎增殖最佳培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+15％马铃薯提取液,原球茎分化最佳培养基为1/2 MS+0.5 mg/L6-BA+20％马铃薯提取液,原球茎分化率达到85.70％;生根最佳培养基为1/2 MS+0.5 mg/L NAA+15％香蕉汁,生根率达到92.77％.(3)原球茎根尖鉴定结果表明,诱导的倍性可以稳定遗传.(4)瓶苗移栽的最佳炼苗时间为5d,移栽成活率达92.30％.该试验建立了铁皮石斛同源四倍体株系新的快繁技术体系,为四倍体试管苗的工厂化生产和推广奠定了技术基础.