丹参多酚氧化酶基因的克隆及表达分析

前期研究发现多酚氧化酶（PPO ）能正向调控丹酚酸B合成，该研究运用RACE技术，从丹参毛状根中克隆到多酚氧化酶基因（SmPPO ，GenBank登录号为KF712274）全长序列，其cDNA全长1930 bp ，开放阅读框为1770 bp ，编码589个氨基酸。将 SmPPO与管状花目其它4个物种进行氨基酸序列比对，在N端类囊体转移结构域中发现都存在2个N‐豆蔻酰化位点。在丹参毛状根培养液中加入不同诱导因子，利用实时荧光定量PCR检测，发现该基因在酵母提取物处理中表达量显著上调，但在银离子、抗坏血酸和L‐半胱氨酸处理中表达受到明显抑制。运用HPLC技术同步检测毛状根中丹酚酸B含量，显示出与基因表达相同的变化趋势。研究表明，丹参中多酚氧化酶基因（SmPPO）对丹酚酸B的合成具有正向调控作用。