电场处理柠条种子对干旱条件下幼叶基因表达的影响

以沙生植物柠条锦鸡儿为材料,设计自然对照(CK)、干旱处理对照(SCK)、电场处理(电场强度2 kV/cm,电场频率15 kHz,处理时间5 min)种子后在干旱条件下进行种子发芽(ET),并采用3个锚定引物和26个随机引物形成78组引物,利用DDRT-PCR技术,分析电场处理柠条种子在干旱胁迫条件下生长的幼苗幼叶基因表达水平的变化,从基因转录水平探讨电场对柠条锦鸡儿抗旱性的影响机理.结果显示:(1)干旱胁迫组相对于自然对照组增加条带282条,缺失条带179条;电场处理组相对于自然对照组增加条带303条,缺失条带200条;电场处理组相对于干旱胁迫组增加条带236条,缺失条带257条.(2)回收差异片段获得电场处理诱导的3个差异表达序列(EST-1、EST 2、EST-3),经Blastn比对,EST-1与大豆LOC100305895 (LOC100305895)一致性为76％,EST-2与鹰嘴豆UDP N-乙酰氨基葡糖肽N-乙酰葡糖胺基转移酶SEC like(LOC101506182)选择性剪切体X2一致性为88％,EST-3与百脉根克隆JCVI-FLLj-5 M12一致性为88％.(3)经Blastx比对,EST-1与1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶(390 aa)145～195氨基酸序列一致性达到52％,EST-2(308 bp)与氧连N-乙酰葡萄糖胺转移酶(744aa)706～744氨基酸序列一致性高达97％,EST-3与酰基辅酶A结合蛋白(90 aa)氨基酸序列一致性高达97％.研究结果为进一步从基因表达的角度分析电场的生物效应及其提高抗逆性的分子机理,为电场处理植物种子的农业技术应用提供理论依据.