两种不同胞内pH敏感染料在激光扫描共聚焦显微镜中的应用

目的: 使用两种胞内pH敏感的荧光染料SNARF-4F/AM和BCECF/AM, 利用激光扫描共聚焦显微镜进行胞内pH值(pHi)的测量.方法: SNARF-4F/AM和BCECF/AM均能被诱导胞内瞬时酸化和碱化, 用单激发双发射比值测量法, 比较SNARF-4F/AM和BCECF/AM的酸化和碱化与浓度线性关系.结果: SNARF-4F/AM孵育的细胞能够被诱导胞内酸化和碱化, 并能较好地反应出浓度与pH值的线性关系, 同时其诱导酸化后能够产生钠氢交换体(Na+/H+ exchanger, NHE)介导的回复相;BCECF/AM孵育的细胞虽然能够产生一定程度的胞内酸化和碱化, 但是其诱导酸化后不能产生NHE介导的回复相, 说明利用SNARF-4F/AM能正确反应细胞内pH值的变化以及细胞膜上pH相关转运器的工作效率.结论: SNARF-4F/AM染料比BCECF/AM类染料更适合激光扫描共聚焦显微镜的使用.