基于NA活性检测细胞基质流感疫苗病毒滴度新方法的建立

目的:建立基于神经氨酸酶(neuraminidase，NA)活性检测细胞基质流感疫苗病毒滴度的新方法，并进行初步应用。方法:对NA活性检测使用底物的浓度和终止液类型、病毒感染靶细胞数目以及细胞裂解剂等反应条件进行优化，采用建立的方法检测细胞基质培养的流感疫苗毒种的病毒滴度，并与传统的病毒滴定法检测结果进行比较。结果:NA活性检测法的最适底物浓度为25 μmol/L，最适终止液为0.2 mol/L Na 2CO 3。细胞数目为4×10 4个/孔，病毒感染48 h后，用0.5% TritonX-100裂解，检测细胞内复制病毒的NA活性，产生的相对荧光值最大。检测4批细胞基质培养的流感疫苗毒种病毒滴度，该方法与传统病毒滴定法检测结果差异无统计学意义( P>0.05)，具有较好的一致性。 结论:本研究建立了基于NA活性检测细胞基质流感疫苗病毒滴度的新方法，可用于生产过程中细胞基质流感病毒毒种的检定。