NLRP3/IL-1β和IL-18在哮喘小鼠肺组织中的表达及与呼吸道炎症的关系

目的 探讨NLRP3(nucleotide-binding oligomerization domain-leucine-rich repeats containing pyrin domain 3)/IL-1β、IL-18通路在哮喘小鼠肺支气管炎症的关系.方法 C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、NLRP3抑制剂格列本脲组和哮喘组,每组7只；格列本脲组和哮喘组采用卵蛋白致敏、诱导建立哮喘小鼠模型,格列本脲组每次雾化激发前30 min腹腔注射格列本脲500 mg/kg;造模后检测小鼠气道反应性、苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠肺组织病理改变、计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及嗜酸细胞百分比、淋巴细胞百分比以了解各组小鼠的支气管炎症程度；采用Western blot和RT-PCR检测小鼠肺组织NLRP3蛋白和mRNA的表达；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠肺组织匀浆上清IL-1β、IL-18含量；并分别对IL-1β、IL-18与BALF中嗜酸性粒细胞百分比进行相关性分析.结果 哮喘组、格列本脲组气道反应性均高于对照组(P＜0.05).哮喘组BALF中白细胞总数、嗜酸粒细胞百分比及淋巴细胞百分比[(29.88±4.97) ×104/ml、(21.67±4.83)％、(31.87±5.31)％]均明显高于格列本脲组[(17.30±1.19) ×104/ml、(12.45±1.12)％、(17.16±0.97)％,P均＜0.05]及对照组[(9.74 ±2.88)×104/ml、(1.15±0.26)％、(10.66±1.83)％,P均＜0.05],而格列本脲组比对照组高(P均＜0.05).哮喘组、格列本脲组肺组织病理检查可见支气管周围较多炎症细胞浸润,但格列本脲组较哮喘组炎症浸润少,而对照组肺组织基本无炎症细胞浸润.哮喘组肺组织NLRP3蛋白及mRNA表达均高于格列本脲组、对照组(P均＜0.05).哮喘组肺组织匀浆上清IL-1β(74.81±17.45) pg/mg及IL-18(426.94±76.05) pg/mg含量均高于对照组[(37.54±5.53) pg/mg,P＜0.05；(249.62±161.20) pg/mg,P＜0.05].IL-1β、IL-18与嗜酸性粒细胞百分比正相关(r=0.833,P=0.02; r=0.856,P=0.014).结论 NLRP3及其下游因子IL-1β、IL-18在哮喘小鼠肺组织中高表达,采用格列本脲进行干预后哮喘小鼠支气管炎症减轻,提示NLRP3/IL-1β、IL-18通路可能在支气管-炎症的形成中发挥着重要作用.