鸡源大肠杆菌毒力基因检测及分子流行特征

[目的]本试验旨在阐明鸡源大肠杆菌致病性及分子流行特性,为探索大肠杆菌流行途径制定合理的防控策略提供新思路.[方法]2018-2019年在河北省采集病死鸡肝脏样品,通过选择培养基筛选、生化鉴定、血清凝集试验对分离菌株进行系统鉴定,应用PCR方法检测分离株中毒力基因流行情况.参考系统发育群分类方法对大肠杆菌进行分群分析,并参照McMLST网站数据库提供的7对管家基因序列进行多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)分析.[结果]结果显示,56株分离株符合大肠杆菌生化特征,分为8个生化表型,B4(30.36％)、B5(25％)和B2(23.21％)为主要生化表型.56株分离株大肠杆菌血清凝集试验均呈阳性,分为11种血清型,O78(26.79％)、O2(23.21％)、O157(17.86％)和O1(14.29％)为主要流行血清型.56株大肠杆菌共检测出15种肠外大肠杆菌毒力基因,未检出papC、ibeA和ibeB基因.黏附相关基因fimC和抗血清存活因子相关基因ompA携带率为100％.aatA、yijP、irp2、mat、iss,检出率分别为98.21％、98.21％、98.21％、96.43％、92.86％.同时,大肠杆菌与铁转运相关基因iroN、fyuA、iucD、irp2检出率均在80％以上.56株大肠杆菌中有20株属于肠出血型大肠杆菌(enterohemorrhagic E.coli,EHEC),其次是肠聚集型大肠杆菌(enteroaggregative E.coli,EAEC)(n=4)、肠产毒素型大肠杆菌(Enterotoxigenic E.coli,ETEC)(n=2).这些菌株D群分离株较多,其次是B2群.通过MLST分型分析,共分为22个ST型,其中ST88(n=7)、ST85(n=6)、ST243(n=6)型为主要流行型.[结论]结果显示大肠杆菌血清型多样,毒力因子种类繁多,致病性大肠杆菌同时携带多种毒力基因,表明动物源大肠杆菌具有较强的毒力基础.