花生根瘤菌Bradyrhizobium sp.MZ5Ⅲ型分泌系统调节基因ttsⅠ突变体的功能分析

[目的]探究慢生型花生根瘤菌Ⅲ型分泌系统在花生-根瘤菌互作的功能.[方法]本研究采用同源重组和三亲本接合转移的方法,构建Bradyrhizobium sp.MZ5的Ⅲ型分泌系统调节基因ttsⅠ突变体;荧光定量PCR检测添加大豆苷元(Daidzein)和染料木黄酮(Genistein)诱导物后野生型和突变株转录水平上ttsⅠ的表达量变化及其差异;蛭石结瘤实验分析ttsⅠ基因突变对花生结瘤能力的影响.[结果]在转录水平上,大豆苷元和染料木黄酮对MZ5的Ⅲ型分泌系统调节基因ttsⅠ的表达具有显著的抑制作用(P＜0.05).在MZ5ΔttsⅠ突变体中ttsⅠ基因的表达量都明显下调,与野生型菌株的相比都达到极显著水平(P＜O.001).蛭石结瘤实验表明,与野生型菌株相比,MZ5 ΔttsⅠ突变体在不同花生品种的结瘤数和地上部干重都显著性降低.根瘤石蜡切片表明,MZ5 ΔttsⅠ突变体在根瘤内的含菌量少于野生型菌株.[结论]Bradyrhizobium sp.MZ5菌株中的Ⅲ型分泌系统在花生-根瘤菌互作中对结瘤有积极的促进作用.