碱胁迫对瓦氏雅罗鱼AKP基因表达及生理应答的影响
Journal of Agricultural Biotechnology(2020)
摘要
碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)可催化多种与磷有关的水解反应,是生物体免疫功能和健康状况的参考指标.瓦氏雅罗鱼(Leuciscus waleckii)是一类对环境(尤其是高碳酸盐水质)具有超强耐受力的鱼类.为明确高碱环境下的各项生理反应和健康状况,本研究对瓦氏雅罗鱼的2种地理种群—达里诺尔湖瓦氏雅罗鱼(简称碱水雅罗鱼)和松花江瓦氏雅罗鱼(简称淡水雅罗鱼)进行30和50 mmol/L NaHCO3的碱胁迫实验,通过酶标仪对血清中的AKP活性进行测定.在30 mmol/L碳酸盐碱度环境下,淡水雅罗鱼血清中AKP活性显著高于碱水雅罗鱼(P<0.05).同时,参考近缘物种鲤(Cyprinus carpio)的AKP基因序列,克隆瓦氏雅罗鱼AKP基因,并对实验鱼的鳃、肝、肾、肌肉和脑5种组织中的AKP基因进行荧光定量PCR测定分析.结果表明,瓦氏雅罗鱼AKP基因ORF序列全长为876 bp(GenBank No.MN473375),编码291个氨基酸.AKP基因在两种雅罗鱼5种组织间的表达变化趋势不同,碱水雅罗鱼AKP基因在肝中随碱度升高上调表达,淡水雅罗鱼AKP基因在肾中随碱度升高上调表达,且在多个组织中不同碱度下的基因表达存在显著差异(P<0.05).综上所述,AKP基因可能参与瓦氏雅罗鱼的耐碱应答.本研究可为深入探讨AKP参与瓦氏雅罗鱼耐碱机制提供基础资料.
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