越背花毛蒙古马皮肤组织中色素生成相关基因TYR、TYRP1及DCT的表达分析

哺乳动物毛色形成的分子机制一直以来是动物遗传育种领域研究的热点,自然界中多种多样的动物毛色引起了许多研究者的兴趣,其中马(Equus caballus)的毛色种类繁杂,是马品种登记中不可或缺的一项内容,马毛色分子机理的研究一直以来非常重要.目前的研究大多为群体间的研究,鲜少有报道从个体毛囊色素合成的角度研究马毛色.越背花毛蒙古马(Tobiano Mongolian Horse)毛色特别,形成机理更加复杂.色素合成过程涉及的基因数量众多,调控网络复杂.其中酪氨酸酶基因(tyrosinase,TYR)、酪氨酸相关蛋白酶1基因(tyrosinase-related protein 1,TYRP1)及酪氨酸酶相关蛋白2基因(tyrosinase-related protein 1,TYRP2)(现称多巴色素异构酶(dopachrome tautomerase,DCT)),是色素合成通路中重要的3个下游基因.本实验采用石蜡包埋组织切片苏木素-伊红(hematoxylin-eosin staining,HE staining)染色技术初步探究了越背花毛蒙古马毛囊结构及色素分布,qRT-PCR方法检测不同颜色部位TYR、TYRP1及DCT基因的表达差异,后续分别利用Westemblot和免疫荧光技术对3个基因相应蛋白进行定量定位分析.结果 显示,越背花毛蒙古马不同颜色(黑,白)皮肤组织中色素分布明显不同,真皮层厚度不同,毛囊毛球直径有差异.3个基因的mRNA与蛋白表达量在不同颜色皮肤组织中的表达有明显差异,蛋白的表达基本定位于毛囊毛球的毛母质部位.最终得出结论,色素合成下游基因TYR、TYRP1及DCT的表达差异影响了越背花毛蒙古马不同颜色皮肤组织中的色素合成,对毛发色素沉积过程具一定的调控作用.本研究为深入研究越背花毛蒙古马毛色分子机理提供资料,并为其他哺乳动物毛色研究提供参考借鉴.