甘蓝型油菜蜡质相关基因的克隆与表达分析

植物叶片中,表皮蜡质对植物的生长发育和适应外界环境起着重要作用.本研究针对拟南芥(Arabidopsis thaliana)已发表的蜡质相关基因信息,基于生物信息学的方法获得以甘蓝型油菜(Brassica napus)品种中双11号为参考的10个蜡质相关基因的44个拷贝序列.然后,以在抽薹期前后叶片蜡质差异明显的3对自然突变的甘蓝型油菜(L1050,P144和W481)为材料,利用同源克隆的方法获得这些拷贝成员在3对甘蓝型油菜中的核苷酸和蛋白序列,通过多重比对分析发现,甘蓝型油菜蜡质基因(waxinducer 2,WIN2)家族中的BnWIN2C01在核苷酸与氨基酸水平上均存在稳定的突变位点.利用qRT-PCR分析基因BnWIN2C01在甘蓝型油菜突变体材料抽薹期前后叶片中的表达情况,结果表明该基因在表皮蜡质合成前后的叶片中达到极显著差异水平(P＜0.01),说明BnWIN2C01基因的特异性表达可能影响了叶片蜡质的合成.本研究将有助于阐明叶表皮蜡质形成过程的分子机理,为提高油菜抗逆性提供一定的参考依据.