产荧光假单胞菌分离鉴定及其质粒DNA复制区的克隆
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY（2002）
摘要
从国内多个地区的65份土样中分离纯化了产荧光假单胞菌株146株,其中菌株DSC3和DKXC1含有质粒.细胞形态、菌落特征的观察和检测证明DKXCl菌株为恶臭假单胞菌(Pseudomonasputida).以其为出发菌株,克隆了该菌质粒DNA复制子1.7kb片段,序列分析结果表明该DNA片段由3个ORF组成,分别编码311、130、115个氨基酸;它与已知的Pf-E.coli穿梭质粒pUCP19的复制区同源性只有49%.该复制子DNA序列已在GenBank登记,登记号为AF273219,这是国内分离克隆的第一个Pseudomonas质粒DNA复制子.以此复制子构建了4.7 kb的E.coli-Pf穿梭载体pYQSPE,该质粒在荧光假单胞菌P303中能够稳定复制和遗传.
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