小麦黄色花叶病毒外壳蛋白基因E.coli表达产物特异性抗血清的制备及其应用

JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY（2002）

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摘要

将小麦黄色花叶病毒(wheatyellowmosaic virus,WYMV)外壳蛋白基因克隆到pET-30a(+)上,获得E. coli表达载体pETWCP.SDS-PAGE和Western blotting分析结果表明,pETWCP在E. coli中经IPTG诱导后,可特异地表达38.5 kD的融合蛋白,光密度扫描分析结果,融合蛋白表达量约占细菌总蛋白的40%.以诱导表达产物作为抗原,免疫家兔制备了特异性强的抗血清,用微量沉淀法测其效价为1:1 024.该抗血清可替代常规病毒粒子抗血清,用于酶联免疫吸附测定、免疫电镜和Western blotting检测WYMV.

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