小鼠胰腺石蜡切片制作程序优化与免疫荧光染色探索

目的 优化小鼠胰腺石蜡切片的制作程序并分析1型糖尿病小鼠胰腺免疫荧光染色结果.方法 多次小剂量链脲佐菌素诱导小鼠1型糖尿病,取胰腺,观察采用不同试剂和处理时间的石蜡包埋程序对胰腺切片质量的影响,并探讨胰腺石蜡切片免疫荧光染色的可能假阳性.结果 95％ 乙醇15min×2次、100％ 乙醇Ⅰ6min、100％ 乙醇Ⅱ7min、苯Ⅰ15min、苯Ⅱ18min、浸蜡90min时制作的小鼠胰腺石蜡切片质量最优.以小鼠抗高血糖素抗体(一抗)及FITC-山羊抗小鼠二抗免疫染色1型糖尿病小鼠胰腺时常常出现假阳性荧光.结论 脱水、透明、浸蜡等制作程序对小鼠胰腺石蜡切片质量影响较大;苯是优于氯仿与二甲苯的胰腺透明剂;1型糖尿病小鼠胰腺不适合以小鼠源抗体为一抗进行间接免疫荧光染色.