改良乙酰胆碱酯酶染色在快速病理诊断先天性巨结肠中的应用

目的 对乙酰胆碱酯酶组织化学染色方法进行改良,使染色操作更加快速和简单,以便能用于术中先天性巨结肠的快速病理诊断.方法 以传统的亚铁氰化铜法为基础并进行改良,将底物碘化乙酰硫代胆碱的浓度增加10倍,高浓度的底物加快渗透组织,缩短孵育染色时间.在孵育染色后用DAB(二氨基联苯胺)处理, 使阳性产物更加稳定,颜色由棕色加深为棕黑色,不容易退色,更易于观察.结果 先天性巨结肠症的直肠黏膜固有层腺体之间可见增生的胆碱能纤维,乙酰胆碱酯酶阳性呈棕黑色,而正常直肠黏膜固有层腺体之间没有增生的胆碱能纤维,乙酰胆碱酯酶染色为阴性.与传统的亚铁氰化铜法相比较,本改良法染色特异性无明显差异,但孵育染色时间从原来的60～120min缩短至10～15min.结论 本改良法使乙酰胆碱酯酶染色操作比传统方法更加快速和简单,结果稳定可靠,可用于手术中先天性巨结肠的快速病理诊断,对临床医生制定先天性巨结肠的治疗方案具有十分重要的意义.