硫化氢减少缺氧时人脐静脉内皮细胞的凋亡

目的 探讨硫化氢对血管内皮细胞缺氧性损伤的保护作用及机制.方法 将人脐静脉内皮细胞于2％ O2、5％ CO2、93％ N2培养箱中培养24h,复制缺氧模型.以硫氢化钠(NaHS)作为硫化氢供体,采用DCFH-DA和激光共聚焦系统检测细胞内活性氧含量;用Fura-2/AM和显微荧光成像系统检测细胞质内钙离子([Ca2+]i)浓度;使用Rh123和激光共聚焦系统检测细胞线粒体膜电位(mitochondria membrane potential,MMP);用Hoechst33342染色观察细胞核形态,计算细胞凋亡率.结果 缺氧使细胞ROS含量显著升高,硫氢化钠预处理显著降低缺氧所致ROS含量的升高;缺氧使细胞[Ca2+]i显著升高,而NaHS、活性氧清除剂NAC、IP3受体抑制剂Xesto C均抑制缺氧诱导[Ca2+]i的升高;缺氧显著降低细胞MMP,NaHS、NAC预处理缺氧细胞则抑制MMP降低;NaHS、Xesto C预处理可显著降低缺氧所致细胞凋亡.结论 硫化氢可能一方面通过减轻缺氧时ROS增多引起的线粒体膜电位下降,保护线粒体功能;另一方面抑制缺氧时ROS增多诱导的钙超载,从而减少缺氧时人脐静脉内皮细胞的凋亡.