ROS/TLR4/RelB、P38通路激活在间歇低氧致树突状细胞表型以及功能改变中的作用

目的 探讨ROS/TLR/RelB、P38通路激活在间歇低氧对人外周血来源树突状细胞(DCs)表型以及功能改变中的作用,为干预睡眠呼吸暂停综合征系统并发症提供新的策略.方法 按照不同干预将DCs分为RelB-Snail转染组、P38-PGenesil-1转染组、Snail转染组、PGenesil-1转染组、ROS清除组(CAT浓度为10、50mmol/L)、TLR4阻断组(HTA125质量浓度为10、50 μg/ml).间歇低氧环境为1.5％低氧浓度,21.0％复氧浓度,低氧/复氧时间比1∶5;设置常氧培养(持续21.0％给氧浓度)以作对照.DCs成熟表型采用CD1a、CD83双标流式细胞仪以及免疫荧光法检测,同种异体混合淋巴细胞增殖反应(MLR)检测DCs刺激T淋巴细胞增殖能力;ELISA法检测IL-12以及MDA的质量浓度;Western blot法检测各组TLR4、RelB以及P38蛋白表达水平.结果 CAT呈剂量依赖性抑制间歇低氧下DCs MDA、TLR4、RelB以及P38表达水平;同时抑制IH下DCs成熟,MLR以及IL-12表达.HTA125剂量依赖性抑制培养后DCs RelB和P38表达,对MDA表达无影响;同样抑制DCs成熟,MLR以及IL-12表达.干预组中,RelB干扰对间歇低氧下DCs成熟抑制最为显著,亦可抑制MLR以及IL-12分泌,但未影响MDA、TLR4以及P38表达.P38干扰对间歇低氧下DCs MLR以及IL-12水平抑制更加显著,亦可影响成熟,同样对MDA、TLR4以及RelB表达无显著影响.结论 间歇低氧下DCs主要通过ROS/TLR4/RelB传递成熟信号,通过ROS/TLR4/P38刺激MLR以及IL-12分泌.其中,RelB是DCs分化成熟的关键,MLR以及IL-12分泌主要由P38介导.