miR-496靶向调控CDK1促进肺癌A549细胞凋亡

为探讨miR-496对肺癌A549细胞的增殖和凋亡调控作用及分子机制,本研究通过荧光定量PCR检测miR-496在肺癌和癌旁组织中的表达,记A549细胞转染miR-496 mimics及对照miR-NC;通过CCK8检测miR-496对肺癌A549细胞增殖的影响,采用流式细胞术检测miR-496对A549细胞凋亡的影响,并通过双荧光素酶报告基因检测miR-496的靶基因;采用Western blotting检测miR-496对靶基因CDK1蛋白表达的影响.荧光定量PCR结果显示,肺癌组中的miR-496的相对表达量较癌旁组比较表达显著下调(p＜0.01).CCK8结果显示,miR-496 mimics组细胞在培养24 h和48 h后细胞增值率(A450值)较miR-NC对照组显著降低.流式细胞术检测结果显示,miR-496 mimics组细胞凋亡率较miR-NC对照组显著增加.双荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-496 mimics与CDK1 3'UTR WT载体共转染组荧光强度明显低于对照miR-NC与WT载体共转染组.Western blotting检测结果显示,miR-496 mimics组细胞的CDK1蛋白表达量与miR-NC对照组比较显著降低(p＜0.01),miR-496 mimics+CDK1组细胞CDK1蛋白表达量与miR-496mimics组比较显著升高(p＜0.01).miR-496能够通过抑制靶基因CDK1的表达,抑制肺癌细胞A549的增殖,促进肺癌A549细胞凋亡.本研究结果有助于了解miR-496和CDK1在肺癌中的作用,为肺癌的治疗提供理论依据和实验基础.